我们开发了一种高效获得人源糖基转移酶的表达系统,通过共表达人源二硫键异构酶,在大肠杆菌中简便高效地获得具有底物选择性的ppGalNAc-T糖基转移酶。并利用该系统表达的活酶,成功地在白介素-2的天然糖基化位点Thr3残基上定点合成了O-糖基化修饰的白介素-2。该构建的大肠杆菌表达系统可以适用于富含二硫键的蛋白表达,并且为体外位点特异性合成O-糖蛋白药物提供了新的技术支持(BBRC, 2020)。
图. 一种高效简便的ppGalNAc-T酶的大肠杆菌表达系统